Strukturelle und funktionelle Analyse der Interaktion zwischen Kinetochor und zentrometrischem Chromatin in Saccharomyces cerevisiae

Ziel des vorliegenden Projekts ist es, strukturelle und funktionelle 金贝棋牌 über die Interaktion der Komponenten des COMA-Komplexes mit der zentromerischen Histon H3-Variante Cse4 und mit dem zentromerischen Nukleosom zu erhalten. Dazu sollen Varianten von zwei Kinetochorkomponenten, Okp1 und Ame1, die eine verst?rkte Bindung an Cse4-N zeigen, genutzt werden. Kristallographische Analysen sowie Cryo-Elektronenmikroskopie sollen angewendet werden, um mechanistische Einsichten in die Interaktionen und die St?chiometrie der Proteine innerhalb des Komplexes zu erlangen. Des weiteren sollen die molekulargenetische Identifizierung der Methyltransferase für R37 von Cse4 sowie die Isolierung und Charakterisierung von Suppressoren, die die Defekte des Verlusts der Cse4-R37 Methylierung kompensieren, neue Einsichten in Chromatinfunktion und Kinetochorarchitektur liefern.Ich war schon immer fasziniert von der Idee, dass Chromatinfaktoren, DNA-Sequenz, DNA-Struktur und Modifikationen an DNA /Proteinen das Potential haben, die Genexpression zu modulieren und dadurch letztlich das Schicksal einer Zelle zu bestimmen. Ein bedeutender Teil meiner Doktorarbeit basierte darauf, die Mechanismen der meiotischen Chromosompaarung durch die Analyse von DNA-Protein und Protein-Protein-Wechselwirkungen in vitro zu verstehen. Dadurch habe ich ein Interesse an der Hefegenetik, Proteinbiochemie und am Imaging entwickelt. Als Postdoktorandin m?chte ich weiterhin auf dem Gebiet der Chromosomenbiologie t?tig sein, aber zukünftig mit einem Schwerpunkt auf regulatorischen Aspekten der Chromosomentransaktionen. Ich m?chte Kenntnisse in Hefegenetik erwerben und meine F?higkeiten in der Proteinbiochemie erweitern.Einer der Schwerpunkte des Labors von Prof. Ann Ehrenhofer-Murray sind die molekularen Details der Assemblierung von Chromatin und die Funktion von epigenetischen Modifikationen an Histonen und Histonvarianten. Das Gastlabor nutzt molekulargenetische, biochemische und strukturelle Ans?tze, um die Rolle von posttranslationalen Modifikationen beim Chromatinaufbau zu untersuchen. Prof. Ann Ehrenhofer-Murray hat mir die M?glichkeit geboten, die Funktion und Regulierung von Kinetochor- und Zentromerproteinen in Saccharomyces cerevisiae zu untersuchen und dadurch zum Verst?ndnis der Kinetochorregulation und den Einfluss auf die Zentromerbiologie beizutragen. Das vorgeschlagene Projekt stellt eine ausgewogene Mischung zwischen biochemischen/ strukturellen Studien und genetische Analysen dar. Dies ist eine ausgezeichnete Gelegenheit für mich, mein Wissen über Proteinbiochemie einzusetzen. Gleichzeitig erm?glicht es mir, mein technisches Repertoire zu erweitern und vertieftes Wissen über Hefegenetik zu erlangen. Die exzellente wissenschaftliche Infrastruktur und die dynamische Forschungsumgebung des Labors werden mir helfen, mich wissenschaftlich weiter zu entwickeln. Ich bin überzeugt, dass dieses Projekt meine akademische Karriere als unabh?ngige Forscherin st?rken wird.