Regulation and mobility of sucrose transporters in higher plants

Ziel des Projektes ist die Analyse der Regulation und der Mobilit?t pflanzlicher Saccharosetransporter. Dabei werden folgende Fragestellungen im Rahmen des Projektes bearbeitet:
1. Zun?chst sollte aufgekl?rt werden, ob die mRNA und/oder das Protein des Saccharosetransporters StSUT1 Phloemmobilit?t aufweisen. Die Lokalisierung des SUT1 Proteins beschr?nkt sich auf die Siebelemente (SE), w?hrend die SUT1 mRNA sowohl in SE, als auch in Geleitzellen (GZ) lokalisiert wurde. Durch intraspezifische Pfropfungsexperimente wurde bereits gezeigt, dass SUT1 mRNA Phloemmobilit?t sowohl in gepfropften Pflanzen, als auch zwischen Kartoffelpflanzen und Tabakpflanzen als Wirt sowie dem Holoparasiten der SUT1 mRNA in den SE oder in den GZ des Phloems stattfindet.
2. Untersuchungen zur Stabilit?t und Halbwertszeit der phloem-mobilen Saccharosetransporter mRNAs zeigten, dass alle bislang bekannten Saccharosetransporter aus Solanum tuberosum einer circadianen Regulation unterliegen und dass ihre Transkripte eine ?u?erst begrenzte Halbwertszeit von 60 bis max. 130 min aufweisen. Zudem zeigten Inhibitorstudien, dass sowohl SUT2 als auch SUT4 mRNA-Akkumulation post-transkriptional gesteuert wird.
3. Die Untersuchung von StSUT4-RNAi Pflanzen zeigte, dass die ?bermittlung von 金贝棋牌 über die Lichtqualit?t (z. B. bei Beschattung) in diesen Pflanzen beeintr?chtigt ist, und dass der Ph?notyp der transgenen Pflanzen ebenfalls durch Pfropfung übertragbar ist.
4. In einem weiteren Ansatz wurde bereits damit begonnen, gezielt nach RNA-Protein-Interaktionspartnern der SUT4 mRNA-Moleküle über einen Hefe-Drei-Hybrid Ansatz zu suchen, die zur Identifizierung von Proteinen verhelfen, die den postulierten Makromolekültransfer durch Plasmodesmen erm?glichen, die SUT mRNA Moleküle w?hrend ihres Langstreckentransports stabilisieren bzw. an der post-transkriptionalen Regulation über sequenz-spezifischen RNA-Abbau beteiligt sein k?nnen. Es wurden mit diesem Ansatz bereits drei mutma?liche RNA-bindende Proteine identifiziert, die in Hefezellen mit der StSUT4 mRNA interagieren.
5. Die RNA-bindendende Eigenschaft der identifizierten Proteine soll durch alternative Methoden wie electrophoretic mobility shift assay (EMSA) best?tigt werden. Die Aufkl?rung der Funktion dieser Proteine für den Langstreckentransport, den Transport über Plasmodesmen, die post-transkriptionale Regulation, die Stabilit?t usw. sind durch weitere Experimente angestrebt.